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【新方案】GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲紅的測(cè)定
發(fā)布日期:2024/1/23

食品中胭脂蟲紅的測(cè)定

SPE-HPLC法




胭脂蟲紅其主要活性成分為胭脂紅酸,是一種蒽醌衍生物,來源于雌性胭脂蟲的天然紅色色素。近年來, 胭脂蟲紅在多種食品中均有添加, 如肉制品、奶制品、果凍、餅干等。我國的《GB 2760-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定食品中胭脂蟲紅的使用范圍和最大使用量。

 

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲紅的測(cè)定》于2023年9月6日發(fā)布,2024年3月6日實(shí)施,標(biāo)準(zhǔn)中樣品經(jīng)鹽酸溶液提取,混合型強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱凈化,C18色譜柱分離測(cè)定。

 

迪馬科技參考《GB 5009.288-2023 食品中胭脂蟲紅的測(cè)定》,建立了食品中胭脂蟲紅的測(cè)定方案,本方案重現(xiàn)了國標(biāo)方法,采用 ProElut® PXA固相萃取柱凈化樣品,Diamonsil® Plus C18色譜柱分離,HPLC-PDA檢測(cè),外標(biāo)法定量,定量限與標(biāo)準(zhǔn)方法一致,回收率在90%~110%之間。



1、適用范圍

本方案適用于果粒橙、果凍、火腿、酸奶、棒棒糖、黑巧克力和調(diào)制乳粉等樣品中胭脂蟲紅的測(cè)定。

 

本方法的定量限為:當(dāng)稱樣量為2g時(shí),液體及半固體試樣(含乳半固體除外)中胭脂蟲紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.02g/kg,固體及含乳半固體試樣(調(diào)制乳粉除外)中胭脂蟲紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.04g/kg,調(diào)制乳粉中胭脂蟲紅(以胭脂紅酸計(jì))定量限為0.1g/kg。



2、標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

(1) 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL)(Cat.#:48204):準(zhǔn)確稱取10.0mg標(biāo)準(zhǔn)品,用水溶解,并定容至10mL容量瓶中,搖勻。

 

(2) 標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:分別準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL于10mL容量瓶中,用0.1%磷酸水溶液定容至刻度,搖勻,配制成質(zhì)量濃度分別為5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L和100mg/L標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。



3、提取 

3.1 液體及半固體試樣(含乳半固體除外)

稱取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過濾,待凈化。

 

3.2 固體及含乳半固體試樣(調(diào)制乳粉除外)

稱取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L),常溫條件下,重復(fù)提取一次,合并兩次提取液,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過濾,待凈化。

 

3.3 調(diào)制乳粉

稱取2g試樣于50mL離心管中,加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),搖勻,置于沸水浴中加熱30min,取出冷卻至室溫后,振蕩5min,超聲5min,5000rpm離心5min,上清液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L),常溫條件下,重復(fù)提取兩次,合并三次提取液,用水定容至刻度,經(jīng)適量脫脂棉過濾,待凈化。



4、凈化

ProElut® PXA 150mg/6mL(Cat.#:68304)

(1)活化:依次加入6mL甲醇、6mL水,棄去流出液;

(2)上樣:將25mL待凈化液加入柱中,棄去流出液;

(3)淋洗:依次加入12mL水、6mL甲醇,棄去流出液,真空抽至柱體近干;

(4)洗脫:加入6mL 2%磷酸甲醇溶液,收集洗脫液;

(5)重新溶解:將洗脫液在40℃水浴下氮?dú)獯抵两?,?.1%磷酸水溶液定容至2mL,渦旋混勻,8000rpm離心5min,取清液上機(jī)分析。



5、分析條件

色譜柱:Diamonsil® Plus C18 150x4.6mm,5μm(Cat.#:99401)

流  速:1.2mL/min    

進(jìn)樣量:10μL

柱  溫:40℃

檢測(cè)器:PDA 494nm

流動(dòng)相:A:0.1%磷酸水溶液 B:0.1%磷酸乙腈溶液

梯度設(shè)置:

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6、添加回收結(jié)果及色譜圖

食品中胭脂蟲紅的HPLC檢測(cè)添加回收結(jié)果。

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